RT-112（人膀胱癌细胞）(STR鉴定正确)

名称RT-112（人膀胱癌细胞）(STR鉴定正确)

别称RT 112;RT112

种属人

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

背景描述Established from the transitional cell carcinoma(histological grade G2)excised from a woman(age unknown)with untreated primary urinary bladder carcinoma in 1973;described in the literature to form tumors in nude mice

生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S

推荐换液频率2~3次/周

冻存条件冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

保藏机构DSMZ;ACC-418

细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注：第一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

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